|
|
 |
Home |
|
|
|
| dc.title : |
Het effect van X-stralen en Gant61 op DAOY-cellijnen in 2D en 3D als onderdeel van het kankeronderzoek
|
| dc.creator : |
Custers, Lize
|
| dc.subject : |
|
| dc.description.abstract : |
Binnen de medische tak van de oncologie is vastgesteld dat hersentumoren op kinderleeftijd een incidentie kennen van 1 op 909.000 per jaar in Europa. Medulloblastomen zijn één van die hersentumoren. Ze bevinden zich in het cerebellum en ontstaan door een afwijkende signalisatiepathway, namelijk de hedgehogpathway. Deze pathway staat in voor celdifferentiatie en celproliferatie tijdens embryogenese en organogenese. Echter kan door mutaties, een afwijkende genexpessie binnen de pathway ontstaan waardoor deze zich in een continue actieve toestand bevindt en dan ontstaat kanker. GLi1 en GLi2 zijn 2 transcriptiefactoren die expressie van hedgehoggenen activeren. Bij een mutatie die ervoor zorgt dat er overtollig veel GLi1 en GL2 aanwezig zullen zijn, kan kanker ontstaan.
Het is reeks bekend dat radiotherapie een effectieve behandeling is tegen kanker. Echter kunnen kankercellen resistentie tegen straling vertonen. Een bijkomende chemotherapie kan deze behandeling versterken. Gant61, een hexahydropyrimidinederivaat, kan de expressie van hedgehoggenen onderdrukken. Het is een kleine molecule, ontdekt in 2007 en heeft een inhiberende werking op de GLi1 en GLi2. Daardoor zou de transcriptie van hedgehoggenen moeten verminderen. Echter heeft dit in een vorig in vitro onderzoek op DAOY-cellen (een medulloblastoomcellijn) geleid door studente Katrien Konings, niet het verwachtte resultaat gegeven (Konings et al., 2019). Er was namelijk geen significant verschil in celoverleving tussen de 2D-gecultiveerde cellen behandeld met X-stralen en de 2D-gecultiveerde cellen behandeld met X-stralen én Gant61. Gant61 is er dus niet in geslaagd om de DAOY-cellen te sensibiliseren voor X-stralen. Een mogelijk oorzaak kan zijn dat er een representatieve structuur van cellen en celsignalisatie miste bij de 2D-kankercellen tijdens het in vitro onderzoek. Daarom wordt Gant61 in dit onderzoek getest op een 3D-gecultiveerde DAOY-cellen. Er werd onderzocht wat het effect van GANT61 en X-stralen met stralingsdosissen 0, 2, 4 en 6 Gray was op DAOY-cellen. Deze behandelingen werden toegepast op een 2D-DAOY-cellen en op DAOY-spheroïden. De spheroïden werden gecultiveerd via 2 methodes: met behulp van agarosemallen en nanoshuttles. Deze methodes werden vergeleken op basis van RNA-opbrengst, aantal operatorhandelingen en tijdsduur. Voor dit onderzoek werd beslist dat het cultiveren met agarosemallen het meeste geschikt is omdat deze kort duurt, gemakkelijk en goedkoop is.
De colony survival assay werd gebruikt om cellen te fixeren en te kleuren. Op die manier kon de celgroei en celoverleving geëvalueerd worden van 2D- en 3D-gecultiveerde DAOY-cellen die al dan niet een behandeling met X-stralen en/of Gant61 ondergaan zijn. Via 'three way anova – multiple comparison’ werd er vastgesteld dat de behandeling met Gant61 en X-stralen de celoverling van DAOY-cellen niet significant reduceert in vergelijking met DAOY-cellen die alleen bestraald zijn. Dit onderzoek toont aan dat het mogelijk is om de effecten van antiankerbehandelingen en stralingstherapie na te gaan met behulp van een in vitro 3D-systeem. Er is echter nog meer onderzoek nodig om met de reeds beschreven testen te kunnen aantonen of er daadwerkelijk effect is van Gant61 en of er in deze context een verschil is tussen 2D- en 3D-celculturen. Tot slot kan er in de toekomst onderzocht worden wat het effect van Gant61 of een andere inhibitor op de celgroei, op de genexpressie en op migratiepatronen is.
Sleutelwoorden: medulloblastoom, kanker, hadrononderzoek, spheroïden, hedgehog pathway, Gant61, X-stralen, colony survival assay, RNA-extractie, DAOY-cellen |
| dc.publisher : |
Hogeschool PXL |
| dc.contributor : |
|
| dc.date : |
2020 |
| dc.type : |
Bachelorproef |
| dc.format : |
|
| dc.identifier : |
http://doks.pxl.be/doks/do/record/Get?dispatch=view&recordId=SEtd8ab2a82171548afd017154d7e01e16bb |
| dc.language : |
dut
|
| dc.rights : |
All rights reserved |
| etd.degree.name : |
Professionele bachelor in de agro- en biotechnologie |
| etd.degree.level : |
Bachelor |
| etd.degree.discipline : |
Biotechnologie: cel- en gentechnologie |
| etd.degree.grantor : |
Hogeschool PXL |
| |
| |
Simple view
|
|
|
©2004-2008 - Hogeschool PXL -
webmaster -
Contact -
Disclaimer
|
|
Home 
