Samenvatting :
Radioactief afval dat overblijft na het opwekken van energie of straling is een belangrijk probleem in de wereld. De meest gebruikte stockagemethode is in een ondergrondse bodemlaag. Dit heeft veel impact op het leven in de bodem. Het SCK•CEN onderzoekt de interactie tussen bacteriën en radionucliden met het oog op wat bacteriën precies doen met het radioactief afval. De interactie wordt uitgetest met behulp van een metaalresistent modelorganisme, namelijk Cupriavidus metallidurans CH34. Van de bacterie is bekend dat het DNA verschillende genen bevat die voor de metaalresistentie zorgen. Naast deze genen, aanwezig in twee plasmiden, wil men in het SCK•CEN ook begrijpen hoe metaalresistentie door andere mechanismen kan veroorzaakt worden, bijvoorbeeld door het gebruik van (co-)enzymen. De doelstelling van dit onderzoek is drieledig. Allereerst werden twee veel gebruikte media, RM en 284 met 0,2% gluconaat, getest op de geschiktheid voor C. metallidurans CH34 en met elkaar vergeleken op basis van groeicurves. Met behulp van een continue meting van de optische densiteit kon geen verschil aangetoond worden. Vervolgens werd de NAD(P)H-Glo Assay voor de luminescentie metingen geoptimaliseerd. Het laatste doel is om inzicht in het mechanisme van metaalresistentie te krijgen met het oog op de co-enzymen NAD en NADP. Hiervoor werden verschillende metaalzouten toegevoegd aan het groeimedium om metaalstress te induceren bij de toegevoegde bacteriën. Vervolgens werden met behulp van het geoptimaliseerde NAD(P)H-Glo Assay protocol de relatieve hoeveelheden NAD+, NADH, NADP+ en NADPH bepaald en werd vergeleken met de normaal groeiende C. metallidurans CH34 in RM-medium. Tijdens de exponentiële groeifase bleek, na het optimaliseren van het protocol, de verhouding NAD+/NADH en NADP+/NADPH hoger te zijn na toevoegen van koperchloride. Bij de stationaire culturen bleek na toevoegen van kobaltchloride en koperchloride een hogere verhouding NAD+/NADH aanwezig ten opzichte van de zuivere C. metallidurans CH34 cultuur in RM-medium. De verhouding NADP+/NADPH bij stationaire culturen bleek enkel hoger te zijn na toevoeging van kobaltchloride en koperchloride en niet voor nikkelchloride ten opzichte van het normale RM-medium.
Kernwoorden: NAD+/NADH; NADP+/NADPH; Cupriavidus metallidurans CH34; Metaalionen |
Wil je naar dit eindwerk verwijzen in je eigen eindwerk, paper of rapport, gebruik dan dit formaat (APA):
Schoep, J. (2017). NAD HELPT CUPRIAVIDUS METALLIDURANS CH34 OM TOXISCHE METAALIONEN TE NEUTRALISEREN.
Onuitgegeven verhandeling, Hogeschool PXL, PXL-TECH.
Gevonden op
op
http://doks.pxl.be/doks/do/record/Get?dispatch=view&recordId=SEtd8ab2a8215c86dfb7015c8756790a26e5.
|
Home 
